LES CONDITIONS PRE-ANALYTIQUES PARTICULIERES

1. ETAT DE JEUNE

1.1 ETRE A JEUN

« Etre à jeun » se définit par un délai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. En général, pour des prélèvements effectués le matin.

Le laboratoire préconise d’être à jeun pour une prise de sang, car l’alimentation apporte elle-même certains éléments dosés. Dans ce cas, il est recommandé de prendre un repas léger et pauvre en matières grasses la veille au soir.

1.2  A DISTANCE D’UN REPAS

Signifie un jeûne de  3 à 4 heures entre le dernier repas et la prise de sang, après le repas la qualité de l’échantillon sanguin est modifiée (trouble, viscosité), ces modifications peuvent perturber le fonctionnement des appareils d’analyse ou gêner la lecture (recherche de cryoglobuline) et conduire à des résultats erronés.

Pour les prélèvements urgents : pas de conditions particulières.

• La glycémie : Le prélèvement sanguin contient des enzymes glycolytiques qui dégradent le glucose présent dans l’échantillon.  Pour stabiliser  le taux de glycémie plusieurs heures, il est indispensable d’utiliser des tubes contenant du fluorure qui va bloquer la glycolyse (tube bouchon gris) ; de même pour les cycles glycémiques et les épreuves d’hyperglycémie provoquée.
• Le bilan lipidique (LDL, HDL, CHOL, TRIGL)
• Dosage des vitamines: vitamine B12 et B9 folates (folates sériques: transport à l’abri de la lumière) :  Pour les autres vitamines, se référer au guide des analyses transmises fourni dans chaque service.
• Le fer

2. LES HORAIRES DE PRÉLÈVEMENT

Le respect de l’heure de prélèvement est primordial car :

• Pour la majeure partie des examens, les valeurs de référence ont été établies à jeun et au lever. Il est donc nécessaire de respecter ces conditions pour pouvoir comparer le résultat obtenu aux valeurs de référence et faire le suivi des résultats si le test est répété dans le temps.
• Certains paramètres varient naturellement en cours de journée (rythme circadien).
• Pour le dosage des médicaments, il est indispensable de respecter un certain délai entre le début du traitement et le moment du prélèvement (lorsque l’atteinte d’un état stable est nécessaire). Il convient également de s’assurer du délai nécessaire entre le prélèvement et la dernière administration du médicament lorsque l’on cherche à déterminer des concentrations à un temps précis (Concentration maximale = pic = quelques minutes après la dernière prise ou Concentration résiduelle = vallée = quelques minutes avant la prise suivante).
• Respect de période de repos pour le dosage de la prolactine.

Prélèvement à effectuer le matin: Certains prélèvements doivent être effectués le matin et  parfois à heure précise, car ces paramètres suivent un rythme circadien. C’est le cas pour :

• Cortisol (8h, 12h, 16h)
• TSH  (le matin )
• Le fer

Dosage de médicaments:

Pour les dosages, préciser quand cela est possible :

• Le début du traitement
• La dose
• La dernière prise
• L’heure de prélèvement

Dépakine : (idem Acide valproïque ou Valproate de sodium) : Dosage à l’équilibre : 2 à 3 jours après le début du traitement .Prélèvement le matin avant nouvelle prise de médicament.

Digoxine : Lorsque le traitement est continu : dosage à l’équilibre 6 à 8 jours après le début de celui ci. Prélèvement le matin avant nouvelle  prise du médicament. En cas d’administration par voie intra veineuse : prélèvement 6 à 8 heures après.

Paracétamol (Acétominophen) : Prélèvement au pic sérique soit 30 à 60 minutes après la prise.

Amikacine : Après la première prise : prélèvement après 1 h et ensuite après 12 h.

• Dosage à l’équilibre : 24 h après début du traitement
• Dosage au « pic » : prélèvement 30 minutes après début de la perfusion
• Dosage au « creux » : avant nouvelle prise du médicament

Vancomycine : Dosage à l’équilibre : à partir du deuxième jour de traitement.

Lors d’un traitement par perfusion discontinue, 2 prélèvements sont nécessaires :

• Concentration résiduelle : 30 minutes avant nouvelle prise
• Concentration au pic : 45 à 60 mn après la fin de la perfusion
• Quand traitement par perfusion continue : prélèvement à n’importe quel moment.

 Gentamicine : Dosage au « pic » : prélèvement 30 mn après la fin de la perfusion.

• Dosage au « creux » : prélèvement juste avant l’injection suivante.

3.    RECOMMANDATIONS POUR LES PRÉLÈVEMENTS

3.1. NOTIONS

• Plasma : sauf mention spécifique, le terme plasma réfère au plasma EDTA ou hépariné.
  Ne jamais utiliser de plasma citraté, oxalaté ou fluoré sauf si cela est spécifiquement demandé.
• Sérum :  le sérum doit être recueilli sur tube sec

3.2. RECOMMANDATIONS POUR LA BIOCHIMIE

 CONSÉQUENCES DE L’HEMOLYSE ET COMMENT L’ÉVITER

 En cas d’hémolyse, un grand nombre de paramètres sont rendus sous réserve (perturbations des lectures photométriques)  et d’autres sont annulés.

2 paramètres essentiellement sont ininterprétables :

• Potassium plasmatique : en effet, la concentration du potassium intracellulaire est environ 40 fois plus élevée que celle du plasma.
• La LDH (enzyme intracellulaire) : la concentration des hématies en LDH est 100 fois plus élevée que dans le plasma.
• Les paramètres comme Fer, Phosphore, haptoglobine, ammoniémie,  folates sériques  ne sont pas fiables. Pour réduire le risque d’hémolyse :

• Le garrot doit être placé 7 à 10 cm au-dessus du lieu de ponction
• Eviter de prélever le bras où se trouve la perfusion
• Si nécessité de repiquer, il est conseillé de changer de bras
• Le garrot doit être laissé 1 minute au maximum
• Prélever de préférence à l’aiguille plutôt qu’au cathéter, sinon prendre un cathéter avec le plus gros diamètre possible.

  ANALYSES NECESSITANT DES EXIGENCES PARTICULIERES DE TRANSPORT

Echantillons à acheminer dans une pochette réfrigérée (4°C):

Pour qu’une pochette réfrigérée joue son rôle de conservation de l’échantillon durant le transport, il faut l’avoir placée antérieurement à son utilisation : ouverte durant 12 heures dans un réfrigérateur à +4°C

Certains prélèvements voient leurs résultats faussés lorsqu’ils sont exposés trop longtemps à une température ambiante.

• Gaz du sang : La glycolyse, provoque la formation d’acide lactique qui modifie le PH. La consommation d’oxygène par les leucocytes a pour effet de diminuer la PO2 et d’augmenter la PCO2.
• Lactates
• Ammoniémie :
• Carboxyhémoglobine
• Parathormone PTH

Echantillons à acheminer à l’abri de la lumière:

• Folates sériques (vitamine B9)

RECOMMANDATIONS DIVERSES

 Ne pas prélever sur cathéter servant à l’administration de liquide de suralimentation contenant de la proline

La natrémie ne doit pas être effectuée  sur des cathéters héparinés

 3.3  RECOMMANDATIONS POUR L’HEMOSTASE

LES CRITERES IMPORTANTS EN HEMOSTASE

En hémostase, les résultats biologiques sont très dépendants de la qualité du prélèvement ainsi que du délai d’acheminement au laboratoire. Ce délai doit être le plus court possible pour les raisons suivantes :

• Risque important d’activation des plaquettes et des facteurs de coagulation au sein des tubes.
• Manque de stabilité de certains facteurs de coagulation, en particulier facteur V et VII.

Délai d’exécution :

Le  tube citraté, bouchon bleu, doit être acheminé à température ambiante, afin de permettre la réalisation des analyses dans un délai de 4 heures après le prélèvement,  que le patient soit ou non sous anticoagulant.

Niveau de remplissage :

Le tube d’hémostase doit être correctement rempli, car le rapport sang prélevé sur anticoagulant doit être respecté : il est de 9/1 (9 volumes de sang pour un volume de citrate de sodium).

–>   Si les tubes sont insuffisamment remplis, les résultats sont erronés. 

Renseignements indispensable à fournir au laboratoire

• Heure de prélèvement (en cas d’injection, noter en plus l’heure d’injection)
• Présence ou non de traitement anticoagulant
• Le nom de l’anticoagulant ainsi que la dose

SURVEILLANCE BIOLOGIQUE DU TRAITEMENT DES THROMBOSES VEINEUSES

TRAITEMENT PAR UNE HEPARINE DE BAS POIS MOLECULAIRE (HBPM)

Activité  Anti Xa : La plupart des HBPM étant essentiellement éliminées par voie rénale, le dosage est principalement nécessaire chez les sujets âgés, les insuffisants rénaux. Le 1er prélèvement peut se faire à la 48ème heure du traitement,

Les prélèvements suivants auront lieu :

• 3 à 4h après injection. (sous cutanée) (si 2 inj./jour)
• 4 à 6h après injection. (sous cutanée) (si 1 inj./jour)Pour dépister au plus tôt une éventuelle thrombopénie induite par l’héparine, la numération plaquettaire est indispensable : 

• Avant l’administration de l’héparine,
• Puis 2 fois par semaine durant le 1er mois de traitement
• Puis une fois par semaine

 TRAITEMENT PAR ANTI VITAMINE K (AVK)

INR : L’INR évalue l’action de l’Anti vitamine K, il n’est rendu que pour les patients sous ou en arrêt de traitement.

• Le 1er prélèvement peut se faire à la 48ème heure du traitement
• Puis, au début du traitement, 2 prélèvements sont à faire par semaine, puis 1 fois par semaine et enfin 1 fois par mois.

 3.4  RECOMMANDATIONS POUR L’HEMATOLOGIE

Numération sanguine :

Lors de la ponction sanguine, ne pas serrer trop le garrot afin d’éviter une hémoconcentration. Après le prélèvement, homogénéiser les tubes en les retournant plusieurs fois.

Remarque : Lorsqu’un patient est atteint d’une maladie hématologique diagnostiquée, il est indispensable de transmettre l’information au laboratoire (écrit sur la pochette de demande d’analyses). Au besoin, contacter un biologiste en cas de demande spécifique (ou suspicion de pathologie hématologique maligne)

Numération plaquettaire :

En cas de découverte d’une thrombopénie, un tube citraté (bouchon bleu) est réclamé au laboratoire en plus du tube EDTA, afin de pouvoir éliminer une fausse thrombopénie (causée par l’EDTA)

Formule sanguine :

Lorsqu’un patient est atteint d’une maladie hématologique diagnostiquée, il est indispensable de transmettre l’information au laboratoire via le bon de prescription dans l’encadré « Signes cliniques / Traitements / Remarques ».

 3.5  RECOMMANDATIONS POUR L’IMMUNO-HEMATOLOGIE

Informations à fournir au laboratoire

Tube EDTA : bouchon mauve 

Indiquer sur le bon de demande lisiblement ou coller l’étiquette administrative :

• Nom du patient, nom de jeune fille, prénom, date de naissance et sexe
• Préciser les antécédents transfusionnels et obstétricaux et les renseignements cliniques importants (notion de RAI positive, injection d’anti D…)
• Préciser le degré d’urgence
• La date et l’heure du prélèvement sont indispensables
• Préciser lisiblement le service demandeur pour assurer le bon retour des résultats

Pour un nouveau né : indiquer le statut immuno-hématologique de la mère (groupe sanguin, phénotype, dernière RAI)

–>  Tout problème d’identité  annule l ‘analyse ; la bonne lisibilité des étiquettes et du bon de demande d’analyse est impérative 

Détermination du groupe sanguin

Pour  la détermination du groupe sanguin d’un patient, il est obligatoire de :

• Réalisation de 2 prélèvements distincts
• Deux ponctions veineuses différentes
• Prélèvement fait par 2 personnes différentes
• Identification du préleveur et du prescripteur sur le bon de prescription
• Date et heure de prélèvement  sur le bon de prescription
• L’étiquette doit être collée sur le tube au moment du prélèvement et après déclinaison de l’identité du patient lui même

  –>Les cartes de groupes sanguins ne sont délivrées que si les deux prélèvements ont été effectués par 2 préleveurs différents.

En cas de transfusion sanguine

Se référer au classeur d’hémovigilance.

3.6  RECOMMANDATIONS GENERALES

A jeun depuis 12 heures	A distance d’un repas (3 heures)	A distance d’un effort intense
Acide Urique	Hormones (sauf cortisol)	Acide lactique * sauf pour les épreuves d’effort
​Alat	Marqueurs tumoraux	Acide urique
Albumine	​Numeration formule plaquettes	Albumine
Asat	Sodium	Asat
Bilirubine	​TP et INR	Calcium
Calcium	Vitesse de sédimentation	Creatine Kinase
Cholesterol total – LDL – HDL *		Glucose
​Clairance *		Phosphore
Cycles Glycemiques (T0)		Pyruvate Kynase
​Fer et bilan ferrique		​Uree
​Gastrine
Glucose
​Homocysteine *
Phosphore *
Potassium
Protéines et electrophorese
​Tests dynamiques
​Triglycerides

REFERENCE :Samples : from the patient to the laboratory, the impact of preanalytical variables on the quality of laboratory results .Walter G.Guder, Sheshadri Narayanan, Hermann Wisser, Bernd Zawta.2003-3rd revised Edition

* Recommandation pour l’accréditation des laboratoires, hors série Annales de biologie cliniques SFBC, 2010